洗滌是ELISA操作步驟中至關(guān)重要

      洗滌是ELISA操作步驟中至關(guān)重要，如果洗滌不當(dāng)，會導(dǎo)致背景值高、假陽性結(jié)果以及實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差等問題。 因此，必須嚴(yán)格按照試劑盒說明書規(guī)定的步驟、體積、時間和次數(shù)進(jìn)行洗滌操作，例如使用多道加樣器、吸管或洗板機(jī)等。下面通蔚為大家整理一些洗板小貼士，大家可以對照了解自己洗板操作是否正確。

1、洗滌液不要溢出孔。在ELISA洗滌過程，洗滌液溢出孔容易交叉污染相鄰的孔，容易造成背景高，從而影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性，尤其是在前兩次洗滌時，由于孔中殘留的未結(jié)合的抗體或抗原濃度較高，溢出后更容易污染相鄰孔，導(dǎo)致假陽性信號。

2、設(shè)置實(shí)驗(yàn)考慮孔位置。為了減少潛在的交叉污染，建議將空白孔、低濃度標(biāo)準(zhǔn)品孔和陰性對照組放置在ELISA板的邊緣或單獨(dú)的區(qū)域。這樣可以盡量避免這些孔受到高濃度樣本或標(biāo)準(zhǔn)品的影響。

正確的甩板方式對于減少交叉污染至關(guān)重要。甩板時，應(yīng)將ELISA板傾斜，使液體流向一側(cè)，然后在干凈的吸水紙上輕拍，以吸干殘留液體。避免旋轉(zhuǎn)甩板，因?yàn)檫@樣容易造成液體殘留和飛濺，增加交叉污染的風(fēng)險。輕微的抖動可以幫助去除殘留液體，但要確保液體不會飛濺到其他孔中。

除了孔位置和甩板方式外，其他操作步驟也可能導(dǎo)致交叉污染。例如，加樣時應(yīng)避免槍頭接觸孔壁，洗滌時應(yīng)避免洗滌液溢出。應(yīng)嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，并采取必要的預(yù)防措施，以**程度地減少交叉污染的風(fēng)險。最終的孔設(shè)置請參考所用試劑盒的說明書。

3、用干凈的濾紙，不要用衛(wèi)生紙。ELISA洗板后，拍干殘留液體是至關(guān)重要的步驟。為了避免污染和干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，強(qiáng)烈建議使用干凈的無塵紙或?qū)Ｓ肊LISA板吸水紙，而不是普通的衛(wèi)生紙。

4、衛(wèi)生紙通常含有細(xì)小的纖維和粉塵，這些物質(zhì)容易脫落并粘附到孔中。這些污染物會干擾后續(xù)的反應(yīng)，導(dǎo)致背景值升高或吸附待測物質(zhì)，從而導(dǎo)致結(jié)果偏低或不準(zhǔn)確。此外，衛(wèi)生紙的吸水性也可能不如無塵紙或?qū)Ｓ梦?，?dǎo)致液體殘留，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性。

5、正確的拍干方式是將ELISA板倒扣在干凈的吸水紙上，并輕輕拍打板底，確保每個孔都充分接觸吸水紙，以吸干殘留液體。避免重復(fù)使用吸水紙，以防止交叉污染。使用干凈且合適的吸水材料對于確保ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性至關(guān)重要。